微生物检测薄膜过滤法滤膜孔径
QC
请教各位同行,目前的薄膜过滤法使用的是0.45微米滤膜。但在目前药物生产过程中,除菌过滤用的滤芯孔径是0.2微米。假设一种情况,在经过除菌过滤后,产品可能存在未知的微生物污染风险,那么是否就意味着0.45微米以下的微生物无法在检测中被截留?
2024-07-05 16:13 Bhqiu     
5个回答

首先,0.45微米不是滤膜的实际孔洞的直径。上个世纪60年代,药液的除菌过滤使用标称孔径0.45微米的滤膜进行,随后美国Frances Bowman博士发现该规格的滤膜无法完全截留每平方厘米膜面积10的4次方到10的6次方量级的某种微生物的挑战,后面行业推出了ASTM-F838的标准测试方法用以表征除菌过滤滤膜的性能。通过该测试的滤膜测试泡点是标称孔径0.45微米滤膜的两倍,所以把这种滤膜的标称孔径定为0.22或者0.2微米。

第二,标称孔径0.45微米的滤膜只是无法保证能够在极端微生物负荷的挑战条件下把所有细菌都全部截留,但是还是具备截留细菌的能力,比如ASTM-F838测试在除菌滤膜后设置的分析滤膜标称孔径通常也是0.45微米,用以截留滤液中可能存在的细菌。
第三,微生物是否穿透滤膜不仅与膜孔径大小有关,与微生物负荷、过滤压力、过滤时间、滤液的表面张力等均有关系。
2024-07-24 19:17 不住     

解答来源于其它网站:

自然界中的大部分细菌尤其是致病,其尺寸都大于0.45微米,所以绝大部分细菌都能被0.45微米的膜截留,而且微孔滤膜并非筛孔,而是一个复杂的通道,标称的孔径是指最大的孔的等效孔径,所以即使是小于0.45微米的细菌也是绝大部分都能被截留,一般情况下截留粘质沙雷氏菌的能力测试HRV大于7,其假阴性的风险已经远远低于无菌检测其他过程(如取样\恢复生长等等)可能导致的风险.所以各国药典对无菌检测的膜都选用0.45微米孔径.

类似问题请搜索识林网站:https://lib.shilinx.com/community.php/qa/thread/id/2258

2024-07-06 09:13 阳光蒲照     

这个问题平常还真没注意观察到,找网络上搜索了一下,PGY论坛上有几位老师的回答感觉很有参考价值,汇总下意见转发来:

1、根据统计学,0.45um多层过滤(一片膜其实内部是多层的),已经能够截留足够多的微生物了。
2、多数微生物和控制菌,对人体有害的微生物都能被0.45截留。能过多层0.45um的菌一般是不常见的,有缺陷的等等。绝大多数自然界的都能被截留。
3、0.22um能截留更多,但残死率也高,养不活。
4、方便经济滤速快够用了。

关于第三点的解释,有位老师做出如下解释:

在pall的技术交流上了解到的。
他们说最初的除菌过滤器,都是用0.45作为除菌级滤膜,那时候是以粘质沙雷氏杆菌来做截留挑战,后来发现有更小的菌可以通过滤膜,所以后来就有了0.22作为除菌级。0.22的选择缺陷性假单胞菌作为挑战(缺陷性假单胞菌也不算是最小的菌,只是从存活能力、生产形态、体积大小等方面综合考虑它比较适合)。
因为生产和检验对除菌的目的不一样,所以选择的滤膜孔径也不一样。
1、生产是为了尽可能的除去药液中的菌,它不用考虑微生物的存货问题,所以综合选用0.22的。

2、但是检验就不一样,像前面说的,除了要考虑截留菌,还要考虑微生物存活的问题。一来,0.45的已经基本可以截留很大部分的细菌。二来,“0.22孔径更小,需要比0.45更大的压力才能把样品过来,而且比0.45更容易堵,越堵就越需要更大的压力,压力越大,微生物越容易死,死了就培养不出来,造成假阴性。”所以检验用0.45的比较合适。

转发的原链接也粘贴出来,可以持续关注该问题。

2024-07-07 11:09 铅笔小旧     

0.45um的滤膜可以过滤绝大多数的微生物,并且0.45um的孔径并不是单纯的一个孔,他是一个复杂的通道,如有<0.45um的微生物,也会有很大的几率被接留在孔道中。
并且随着样品的滤入,会增加过滤难度,提高细菌截留的可能。
但是不排除,会有0.2um以下的微生物透过的可能。

2024-07-07 13:24 用户pidx     

理论上是你说的那样,但检测与生产之所以选择不同孔径的滤膜,主要原因是两者的出发点不同,前者的主要目的是长出来,而后者的目的是尽量全部去除。

2024-07-07 18:22 Bill