这个问题很有意思。我们实验室也讨论过，在无菌检验中也是这么描述的，如果在最后一次冲洗液加菌过滤，那么在什么时候加，如果在无菌室加，那么菌液可能会破坏无菌环境，如果在阳性加，那么样品需要转移，这个过程不好控制。于是我们并没有在最后一次冲洗液中加菌，而是注入培养基后，转移至阳性，然后在阳性里，将菌液直接加入了培养基中。

问题1：我个人认为，在最后一次冲洗液中加菌，确实同步检验了滤膜的富集能力，但操作上存在以上问题，因此我们采用上述描述的操作方法。同时，在2019版《中国药典检验标准操作规范》P432，无菌检验中，找到了这句描述“因方法适用性试验旨在确认供试品在该实验条件下无抑菌活性或其抑菌活性可以忽略不计，可向最终培养体系中直接加入小于100CFU的试验菌。‘’因此，我们的做法符合标准操作规范的要求。

问题2：阳性加菌时间可同问题1.

问题3：日常检测可同问题1.