根据ICH Q5D《用于生产生物技术/生物产品的细胞底物的起源和特征描述》第2.2.2.节：避免被污染的细胞基质（或细胞库）用于生产是十分重要的，否则，由于受污染的细胞库不能使用，必须重新生产细胞库，这将延误产品上市或开发的时机。应该认识到没有哪一种细胞库检测方案能检测出所有可能潜在的污染；因此，只有在细胞建库期间采取预防措施，才是确保细胞不被污染，为生产提供可靠的细胞库。

因此ICH Q5D强调在受控环境中进行细胞库制备以确保防止污染的重要性。由于细胞库不能进行最终灭菌，因此应在无菌条件下进行制造，以防止污染和交叉污染。

ISPE Baseline Vol 6：Biopharmaceutical Manufacturing Facilities

Cell Bank Preparation：The preparation of Master Cell Banks (MCBs) and Working Cell Banks (WCBs) are usually open operations. The process of selecting a clone and culturing it in preparation of the MCB, requires open manipulations that are normally performed in a Grade A/5 environment.

PDA TR.90 Contamination Control Strategy Development in Pharmaceutical Manufacturing

Master and working banks are sterile or axenic, and they should be manipulated in a dedicated, well-controlled and contained environment, such as a Grade A setting, where aseptic technique is critical. Biological starting material should have adequate source documentation to ensure that animal-derived materials, if used, were controlled for transmissible spongiform encephalopathy (TSE) and BSE. Testing is performed for sterility (or purity for microbial materials) and to ensure that mycoplasma, bacterial endotoxins, and viral contamination are not present.

一般建议细胞建库可采用隔离器；若采用BSC，背景至少应达到C级及以上，降低背景环境潜在微生物负荷带来的影响（包括建议采用长手套或无菌手套）。对于BSC环境监测，建议风险评估可参考以下相关指南

• 《药品GMP指南》（2023版）第4.6节“非活性粒子通常对细胞培养性能不产生关键影响，并非该阶段主要关注的污染源”；
• PDA TR.13-2 Fundamentals of an Environmental Monitoring Program Annex 1: Environmental Monitoring of Facilities Manufacturing Low Bioburden Products：第3.0小节，在生产过程中实施的监控应与风险评估一致，并反映出支持生产工艺所需的监控。…如果主要担忧的是引入活性微生物，则风险评估可能得出结论，在生产过程中进行悬浮粒子监测不仅没有提供价值，而且会增加操作的风险（假设使用手持式悬浮粒子计数器），因此不应在生产过程中进行，而活性颗粒的监测更重要。

      非活性粒子于细胞建库阶段不产生关键影响，悬浮粒子则可在非生产期间定期监测，避免生产过程因环境监测带来额外的风险。但建议BSC仍需关注微生物监测（沉降菌、浮游菌以及人员手套表面微生物），浮游菌取样属于主动采样过程，往往结合沉降菌（被动采样）同步进行环境监测，考虑您说的BSC空间较小，浮游菌不进行监测，建议需要充分合理的评估（如侵入式环境监测破坏单向层流）或历史数据。

      如ICH Q5D所提及，考虑患者用药可及性、商业因素（延误产品上市或开发的时机），相比之下，污染发生对细胞库建库影响往往比单抗上游细胞培养的影响更大，建议细胞库应采用更加严格的控制措施。

      以上建议内容供参考。

建议增加人员的手表面微生物取样。粒子/浮游可以不做。

BSC每次检测时监测沉降和表面。
但是每个月应该有一次的表面，沉降，粒子，浮游的检测。空间不大，同样可以测，也应该能达到A级的要求

无菌操作不代表整个环境一定达到无菌级别，是指的操作行为需要按照无菌的标准来。监控方式可以根据上述你提到的来。